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十二指肠溃疡主要临床表现为上腹疼痛，可为钝痛、灼痛、胀痛或剧痛，也可表现为仅在饥饿时隐痛不适，典型表现为轻度或中度剑突下持续性疼痛，可被制酸剂或进食缓解。
临床上超过一半的疼痛，呈现节律性。早餐后1到3个小时开始出现上腹痛，如不服药或进食则要持续至午后才能得到缓解。饭后2到4小时又开始疼痛，进仓后可缓解。约半数患者有午夜痛，患者常可痛醒。
节律性疼痛大多数持续几周，随着缓解数月，可反复发生。通过胃镜可对十二指肠粘膜直接观察摄像，也可在直视下取活组织做病理学检查是诊断十二指肠溃疡的最主要方法。
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