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如果患者没有一些肛管的狭窄等疾病，行电子肛门镜检查一般不痛苦，如果患者存在肛裂，直肠严重狭窄和脓肿等，应当在麻醉下进行。患者比较遭罪，有时会引起肛门疼痛，先使肛门镜头部在肛缘做，适当的按揉，带肛门松弛后，再将镜头缓缓插入肛门内。
进镜方向先指向脐部，通过肛管后改向敌尾部继续插入，待镜身充分插入直肠内，再抽出镜栓边推进边观察肛管直肠情况。为观察不同角度的病变，有时需反复进入。进镜时如果患者痛苦比较大，应立即停止查找原因。若为括约肌痉挛，可换用小号肛门镜或局麻后检查。
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